在外科病理實(shí)驗(yàn)中,良好的HE切片對(duì)正確診斷至關(guān)重要,尤其對(duì)淋巴組織病變更為重要,良好的細(xì)胞形態(tài)學(xué)細(xì)節(jié)對(duì)診斷及分型很重要。質(zhì)量好的HE染色可見(jiàn)3種紅色(大紅、粉紅和紫紅)顯示色彩亮麗、對(duì)比鮮明及細(xì)膩的細(xì)節(jié);可顯示單個(gè)細(xì)胞周?chē)鸁o(wú)收縮間隙,核染色質(zhì)清晰。切片厚度4um能較好評(píng)估組織結(jié)構(gòu),可顯示細(xì)胞形態(tài)學(xué)細(xì)節(jié)。
一、影響HE染色切片的主要因素
1、組織固定與處理:
(1)緩沖液
(2)及時(shí)固定(大標(biāo)本需要切開(kāi))
(3)組織處理過(guò)程中充分脫水(小組織脫水時(shí)間需要縮短,否則導(dǎo)致細(xì)胞收縮)
2、組織切片
(1)蠟塊切片前充分水化
(2)石蠟切片在水中充分展開(kāi)
(3)薄切,切片厚度一致無(wú)刀痕。切片厚難以識(shí)別細(xì)胞形態(tài)學(xué)細(xì)節(jié)
3、HE染色
(1)蘇木素染色充分
(2)酸性酒精分化很重要(0.3%,不要太濃也不要太稀)
(3)伊紅染色充分,酒精稀釋可導(dǎo)致紅色顯色減弱
(4)不同類(lèi)型的蘇木素決定酸性粘液能否上色(mayer蘇木素不能染酸性粘液,可導(dǎo)致重要信息丟失)
4、脫水與封片:染色后干片(如用電吹風(fēng)、烤箱和高溫室進(jìn)行加熱干片,而非用二甲苯)導(dǎo)致明顯的細(xì)胞變形。染色后十片不僅影響HE切片,而且影響免疫染色切片
一張差的HE染色切片不能通過(guò)免疫組化、分子檢測(cè)等其他技術(shù)得到彌補(bǔ)。欠佳的HE切片影響正確診斷和分類(lèi),導(dǎo)致許多重要的組織學(xué)形態(tài)細(xì)胞丟失。若存在問(wèn)題,需要復(fù)閱HV染色切片,與技術(shù)員共同探討改善HE染色切片質(zhì)量。
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